Co-coltura 2D di cellule leucemiche con BMSC: un metodo per ottenere sottopopolazioni di cellule leucemiche

- In un sistema di co-coltura 2D, più tipi di cellule vengono coltivati insieme in piastre di coltura piatte. Questo sistema di coltura facilita lo studio delle interazioni cellulari e del comportamento in vitro. Per stabilire la co-coltura di cellule leucemiche con cellule stromali del midollo osseo, o BMSC, aggiungere una sospensione di cellule leucemiche a una coltura monostrato aderente di BMSC. Incubare la piastra in condizioni di coltura appropriate. Mantenere la co-coltura sostituendo il 90% del terreno di coltura ogni quattro giorni.

Durante questa co-coltura 2D, le cellule leucemiche interagiscono con le BMSC e si localizzano in regioni distinte della coltura, formando tre sottopopolazioni. La microscopia a contrasto di fase consente di differenziare visivamente le tre sottopopolazioni. Il primo gruppo di cellule leucemiche che appare liberamente fluttuante nel mezzo è classificato come cellule sospese. Il secondo gruppo di cellule leucemiche che hanno aderito alla superficie del monostrato BMSC appare luminoso e sono classificate come cellule luminose di fase.

Il terzo gruppo di cellule leucemiche che sono migrate sotto il monostrato appare debole e sono classificate come