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Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 4:59 min. • April 30th, 2023
- I retrovirus sono virus a RNA che si replicano utilizzando la trascrittasi inversa per convertire il loro genoma a RNA in DNA a doppio filamento e integrarsi in modo permanente nel genoma dell'ospite. Nuove particelle virali escono dalla cellula e possono infettare altre cellule. La terapia genica del cancro impiega vettori retrovirali per introdurre geni terapeutici nelle cellule bersaglio attraverso una tecnica chiamata trasduzione per sottoregolare il gene mutato o eliminare le cellule.
Per ottenere vettori retrovirali ad alto titolo, trasfettare le cellule HEK 293 con una miscela di trasfezione contenente il plasmide retrovirale desiderato, il plasmide di confezionamento e un agente di trasfezione adatto. Incubare le cellule. L'agente trasfettante facilita la consegna di entrambi i plasmidi nelle cellule.
Il plasmide retrovirale codifica il genoma virale con il gene bersaglio, mentre il plasmide di imballaggio codifica le proteine dell'involucro virale. Il macchinario cellulare delle cellule di imballaggio forma particelle retrovirali e le rilascia nel mezzo. Raccogliere il surnatante virale e centrifugare per rimuovere le cellule.
Trasferire la concentrazione desiderata di p
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