Selezione immunomagnetica negativa: un metodo per purificare le cellule B dalle cellule mononucleate del sangue periferico

Le cellule mononucleate del sangue periferico o PBMC includono cellule B, cellule T, cellule natural killer o NK e monociti. Le cellule B producono molecole di immunoglobuline per combattere le infezioni. Nella leucemia, queste cellule si moltiplicano e metastatizzano in diversi organi.

Per isolare le cellule B, iniziare con una sospensione di PBMC isolate. Aggiungere una miscela di anticorpi primari diretta contro specifiche molecole di superficie cellulare chiamate cluster di differenziazione o CD. Gli anticorpi specifici si legano alla molecola CD-3 sulle cellule T, alla molecola CD-14 sui monociti e alla molecola CD-16 sulle cellule NK, lasciando le cellule B non marcate.

Quindi, lavare il campione per rimuovere gli anticorpi non legati. Aggiungere al campione microsfere magnetiche secondarie coniugate con anticorpi. Gli anticorpi secondari si legano alla regione FC degli anticorpi primari attaccati a cellule specifiche. Posizionare il tubo contenente la sospensione cellulare marcata sotto l'influenza di un campo magnetico. Nel campo, le cellule marcate magneticamente migrano e si legano alla parete del tubo, portando alla selezione negativa delle cellule indesiderate. Raccogli