Imaging della dinamica del calcio nelle cellule pancreatiche: una tecnica per studiare i cambiamenti in tempo reale nella concentrazione citosolica di calcio nelle isole pancreatiche

- Le isole pancreatiche sono un gruppo di cellule pancreatiche produttrici di ormoni che svolgono un ruolo cruciale nel mantenimento dell'omeostasi del glucosio. Un'elevata concentrazione di glucosio innesca la chiusura dei canali ionici del potassio, prevenendo l'efflusso di ioni potassio, portando alla depolarizzazione della membrana. Di conseguenza, i canali degli ioni calcio voltaggio-dipendenti si aprono, consentendo l'afflusso di ioni calcio. Questo aumento della concentrazione citosolica di calcio stimola il rilascio di ormoni come l'insulina. In tempo reale, per visualizzare la dinamica citosolica del calcio, trasferire alcune isole caricate con un colorante indicatore di calcio adatto tra le pareti distanziatrici di una rete fine preassemblata.

Posizionare la rete capovolta su un vetrino coprioggetti posizionato all'interno della camera di imaging di un microscopio invertito. Posiziona una maglia grossolana e un peso per immobilizzare le cellule. Aggiungere la soluzione di imaging nella camera. Successivamente, imposta un sistema di perfusione per introdurre il glucosio o un ormone di test di interesse. All'interno delle cellule, gli indicatori fluorescenti di calcio preca