Induzione della metaplasia acina-duttale: un metodo per studiare la differenziazione da cellula acinara a cellula duttale in coltura 3D ex vivo

- La porzione esocrina del pancreas costituisce le cellule acinose e le cellule duttali. Le cellule acinose sintetizzano e secernono enzimi digestivi nel loro lume. Le cellule duttali rivestono il tubo che fornisce questi enzimi all'intestino tenue. Per adattarsi allo stress genetico e ambientale, le cellule acinose subiscono una conversione morfologica e funzionale in cellule simili a dotti, chiamate metaplasia acinar-duttale o ADM.

A volte, l'ADM può portare all'insorgenza del cancro al pancreas. Per indurre l'ADM ex vivo, preparare una sospensione cellulare di collagene raffreddata combinando le cellule acinose primarie con il gel di collagene tenuto su ghiaccio per prevenire la solidificazione della matrice. Trattare la sospensione con un test ADM stimolante o inibitore di interesse.

Distribuire la sospensione in una piastra di coltura e incubare per facilitare la solidificazione del collagene e incorporare le cellule all'interno. Quindi, pipettare un volume aggiuntivo di terreno contenente lo stimolante o l'inibitore ADM del test di interesse sullo strato cellulare di collagene solidificato.

Incubare la piastra per una durata adeguata. Con l'induzione della metaplasia da acero