Saggio del flusso extracellulare in sferoidi 3D: un metodo per misurare l'attività metabolica degli sferoidi tumorali del pancreas

- Le cellule tumorali del pancreas interagiscono con i fibroblasti associati al cancro nel microambiente tumorale o TME. Queste interazioni modulano l'attività metabolica delle cellule tumorali e influenzano la progressione del cancro.

Gli sferoidi sono gli aggregati cellulari che ricapitolano il TME in vitro. Pertanto, possiamo utilizzare questi sferoidi per testare i cambiamenti nelle funzioni metaboliche del tumore mediante saggio del flusso extracellulare. Questo test misura la concentrazione extracellulare di ossigeno e protoni per determinare rispettivamente il metabolismo aerobico e glicolitico.

Inizia assumendo sferoidi 3D di dimensioni adeguate realizzati co-coltivando cellule tumorali pancreatiche con fibroblasti pancreatici. Ora, trasferisci gli sferoidi in una piastra di analisi del flusso e coprila con una cartuccia del sensore contenente i farmaci in esame. Eseguire il test in un analizzatore di flusso extracellulare.

L'analizzatore di flusso inietta pneumaticamente i farmaci in esame dalla cartuccia del sensore alla piastra di analisi in momenti specifici. In risposta ai farmaci in esame, le cellule rilasciano protoni e ossigeno nella microcamera della piastra e i fl