Modello murino ortotopico fluorescente: impianto di cellule tumorali che esprimono GFP nel topo per valutare la progressione del tumore in vivo

- Le cellule tumorali che esprimono la proteina fluorescente verde o GFP consentono di monitorare la crescita e le metastasi del tumore mediante imaging ottico non invasivo. Di solito impiantamo queste cellule in un modello ortotopico, che consente la ricreazione del microambiente tumorale e imita l'interazione delle cellule tumorali con l'ambiente circostante.

Inizia posizionando un mouse anestetizzato su un termoforo caldo. Ora, inserisci il naso in una maschera nasale per fornire ossigeno e isoflurano, un anestetico. Usando una forbice, fai una piccola incisione e taglia il tessuto. Estrarre delicatamente la milza insieme al pancreas e individuare la coda pancreatica.

Caricare una siringa con una sospensione fluorescente di cellule tumorali e iniettarla delicatamente nella coda pancreatica. Una bolla superficiale appare nel sito di iniezione confermando l'avvenuto impianto. Riposizionare gli organi nella cavità del corpo e utilizzare una sutura sterile per chiudere l'incisione. Ora, rimetti il mouse in una gabbia e monitoralo fino al recupero.

Trascorso il periodo di tempo desiderato, posizionare il mouse in una camera di imaging e scattare le immagini. Il raggio di luce colpisc