Isolamento delle cellule staminali PDAC: un metodo per isolare le cellule staminali tumorali dai tumori del pancreas

- Le cellule staminali del cancro al pancreas o CSC sono un sottoinsieme di cellule tumorali auto-rinnovabili e possono dare origine all'intero tumore. Le CSC risiedono in una nicchia ben protetta costituita da altre cellule, come fibroblasti, cellule immunitarie, cellule endoteliali e componenti della matrice extracellulare, come citochine e fattori di crescita. Le interazioni che avvengono tra le cellule in un tale ambiente aiutano le CSC a propagarsi e ad aumentare la crescita tumorale.

Per studiare le proprietà delle CSC, le isoliamo dai tumori del pancreas. Iniziare prelevando la sospensione cellulare dal tessuto tumorale pancreatico umano in un terreno di coltura CSC. Successivamente, seminare la sospensione, costituita principalmente da fibroblasti e CSC, su una piastra rivestita di gelatina e incubarla per la durata desiderata. I fibroblasti aderiscono alla superficie della gelatina, lasciando le CSC libere di fluttuare nella sospensione cellulare.

Prelevare una piccola quantità di sospensione cellulare e aggiungere il tripano blu. Pipettare questa miscela in un emocitometro e contare il numero di cellule vitali. Il blu di tripano entra nelle cellule morte e le colora di bl