Monitoraggio del microambiente tumorale basato su PTM: un metodo per monitorare i cambiamenti nella rigidità della ECM utilizzando gli sferoidi tumorali

- Nell'invasione tumorale, le cellule tumorali periferiche subiscono una transizione da epitelio a mesenchimale o EMT, con conseguente degradazione locale della matrice extracellulare o ECM. Possiamo studiare l'interazione delle cellule tumorali con la ECM in vitro.

Per studiare queste interazioni, trasferire uno sferoide preformato derivato da cellule tumorali pancreatiche su una piastra contenente scaffold di collagene insieme a sonde traccianti fluorescenti incorporate e terreni di coltura. Lo sferoide tumorale rilascia proteasi, che degradano il collagene e riducono la rigidità della MEC, determinando il libero movimento delle sonde traccianti nella MEC.

Incubare la piastra per la durata desiderata. Osservare il campione al microscopio ottico per osservare la griglia dei punti di campionamento nell'impalcatura di collagene e registrare i dati video da essi. La regione della matrice vicino allo sferoide mostra la massima degradazione del collagene. Pertanto, ha un aumento del movimento della sonda. Al contrario, l'area più lontana dallo sferoide mostra una minore degradazione del collagene, con conseguente limitazione del movimento delle molecole della sonda.

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