JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 5:43 min. • April 30th, 2023
- L'imaging a bioluminescenza consente il tracciamento non invasivo delle cellule tumorali per studiare la loro distribuzione all'interno di modelli tumorali animali. Per generare un modello murino, prendere un topo anestetizzato e sterilizzare la sua zona addominale. Fai un'incisione chirurgica per localizzare la milza. Estrailo dalla cavità addominale ed esponi il pancreas sottostante.
Successivamente, iniettare nel pancreas del topo una sospensione refrigerata di cellule tumorali pancreatiche trasdotte mescolate in una matrice di idrogel adatta. Queste cellule geneticamente modificate esprimono enzimi luciferasi. Tenere la siringa in posizione per consentire alla sospensione della matrice cellulare di solidificarsi, riducendo al minimo le perdite.
Riposizionare gli organi nella cavità addominale e suturare l'incisione. Consenti al mouse di riprendersi. Una volta che il tumore si sviluppa, anestetizzare il topo e iniettare una soluzione di substrato bioluminescente nella vena caudale. Consentire alle molecole di raggiungere il sito tumorale contenente le cellule che esprimono la luciferasi.
All'interno delle cellule, gli enzimi luciferasi catalizzano l'ossidazione delle molecole
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