Saggio di invasione delle cellule tumorali: un metodo 3D in vitro basato su matrice nativa per valutare le interazioni tra cellule epiteliali-mesenchimali

- Per iniziare il saggio, per prima cosa, pipettare una sospensione di cellule di fibroblasti integrata con acido ascorbico in una piastra a pozzetti e incubare. L'acido ascorbico aumenta la proliferazione dei fibroblasti. Stimola anche la secrezione di componenti nativi della MEC, incorporando così le cellule proliferanti nella spessa matrice extracellulare.

Rilasciare delicatamente la matrice dalla superficie della piastra e lasciarla galleggiare nel supporto. La matrice si contrae e diventa più spessa con una maggiore deposizione e rimodellamento della matrice, dando origine a un tessuto simile al derma nativo. Stendere la matrice su una rete porosa. Successivamente, semina le cellule tumorali epiteliali sulla matrice e incuba affinché le cellule si stabiliscano e si attacchino.

Trasferire il gruppo su una piattaforma a maglie preassemblata in un piatto. Aggiungere terreni per integrare solo lo strato inferiore della matrice per generare un'interfaccia aria-liquido per le celle soprastanti. Durante la coltura, l'interfaccia promuove la proliferazione e la differenziazione delle cellule tumorali. Le cellule secernono anche proteasi che degradano la MEC, facilitandone la migrazion