JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:24 min. • August 7th, 2025
Prendi i costrutti del muscolo scheletrico biostampati.
Questi costrutti contengono pilastri di idrogel di fibrina con fibre muscolari e microsfere incorporate.
La microsfera è una struttura polimerica porosa che racchiude fattori neurotrofici.
Prendiamo i gangli della radice dorsale isolati da embrioni di pollo.
Posiziona un ganglio su ogni costrutto e incuba.
I fattori neurotrofici vengono rilasciati dalle microsfere a concentrazione fisiologica controllata, facilitando la germinazione di proiezioni dai neuroni chiamati neuriti.
Aggiungere un fissativo per fissare i costrutti.
Lavare con un tampone e aggiungere una soluzione bloccante per prevenire il legame di anticorpi aspecifici.
Incubare con gli anticorpi primari, che si legano specificamente al neurite.
Risciacquare con tampone per rimuovere gli anticorpi non legati.
Aggiungere anticorpi secondari marcati in fluorescenza che si legano agli anticorpi primari.
Lavare con tampone per rimuovere gli anticorpi in eccesso.
Montare il costrutto utilizzando un mezzo di montaggio contenente un colorante nucleare e un vetrino coprioggetti.
Sotto un microscopio confocale, visualizza la crescita dei neuriti.