JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:24 min. • August 29th, 2025
Inizia con una configurazione di microiniezione sterile riempita d'acqua composta da una siringa collegata a un microiniettore tramite un tubo di plastica.
Ritrarre leggermente lo stantuffo della siringa per creare una bolla d'aria nel tubo.
Immergere la punta del microiniettore nell'agente terapeutico e tirare lo stantuffo per aspirare la soluzione.
Prendete un ratto sveglio con un cappuccio protettivo per la testa e due cannule guida pre-impiantate inserite nelle specifiche regioni bersaglio del cervello.
Tieni il petto del ratto contro il petto dello sperimentatore per ridurre al minimo lo stress.
Pulire l'area intorno alle cannule con una soluzione sterile.
Inserire i microiniettori caricati con il farmaco nelle cannule guida per raggiungere i siti target.
Avvia l'infusione del farmaco e monitora la sua erogazione monitorando il movimento della bolla.
Una volta completata l'iniezione, tenere premuto brevemente, quindi estrarre i microiniettori. Inserire gli otturatori nelle cannule per evitare contaminazioni.
Questo metodo consente la somministrazione mirata di agenti terapeutici nel cervello dei roditori.
Tirare indietro lo stantuffo della siringa di 0,2 microlitri per creare una bolla tra l'acqua sterile e il tubo in PE 20 e la soluzione da iniettare.
Successivamente, posizionare il microiniettore nel reagente da iniettare e tirare lentamente lo stantuffo della siringa fino all'arresto posteriore. Per preparare l'animale per l'iniezione, tenere il torace del ratto contro il torace dello sperimentatore. Pulire l'area intorno alla cannula con un applicatore di cotone imbevuto di Betadine.
Tamponare il cappuccio della testa tre volte con Betadine e poi tamponare con etanolo due volte. Quindi posizionare il micro iniettore riempito nella cannula. Premere start sulla pompa di microiniezione e monitorare il movimento della bolla.
Al termine dell'iniezione, rimuovere il micro iniettore dalla cannula e sostituirlo con l'otturatore.