JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 6:05 min. • August 29th, 2025
Metti al sicuro una topolina incinta anestetizzata con l'utero esposto contenente embrioni di pre-neurulazione. In questa fase, la placca neurale è aperta ed esposta direttamente al liquido amniotico.
Posizionare gli embrioni selezionati su una capsula di Petri con una membrana elastica per stabilizzarli. Fissare gli embrioni e applicare soluzione salina per l'idratazione.
Allineare la sonda ecografica sull'embrione e misurare il diametro della cavità amniotica per calcolare il volume di iniezione ottimale.
Posizionare un ago per nanoiniezione contenente una soluzione lentivirale ad alto titolo sopra l'embrione bersaglio con un angolo quasi perpendicolare.
Iniettare un piccolo volume preciso nella cavità amniotica, ritrarre delicatamente l'ago e rimuovere la sonda ecografica.
Spingi delicatamente gli embrioni all'interno del topo.
Il lentivirus iniettato si fonde con le cellule della placca neurale, rilasciando il suo materiale genetico, che subisce la trascrizione inversa nel DNA e viene integrato nel genoma ospite.
Ciò consente una manipolazione genica stabile nelle cellule della placca neurale, supportando potenziali applicazioni terapeutiche.
Usando una pinza, tieni il tessuto tra gli
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