JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:30 min. • August 29th, 2025
Inizia con un ratto neonatale anestetizzato posizionato su un termoforo con un nervo sciatico esposto.
Sollevare il sito distale del nervo e iniettare una soluzione di DNA plasmidico mescolata con un colorante. Il colorante aiuta a tracciare la consegna dei plasmidi.
Posiziona un elettrodo a pinzetta attorno al nervo, mantenendo un piccolo spazio tra i bracci dell'elettrodo.
Introdurre soluzione salina in questa fessura per la conduzione della corrente.
Applicare un impulso elettrico che circonda le fibre nervose che crea pori transitori della membrana nelle cellule di Schwann. Quindi, invertire le posizioni degli elettrodi e applicare un secondo impulso elettrico. Questo migliora l'ingresso del DNA plasmidico attraverso i pori.
Dopo l'elettroporazione, la membrana cellulare si richiude e intrappola il plasmide.
Pulisci il sito, sigilla l'incisione cutanea, disinfettala e lascia che il ratto si riprenda.
Successivamente, il DNA plasmidico trasloca nel nucleo e si integra nel DNA della cellula di Schwann, consentendo il successo del trasferimento genico.
Tirare delicatamente il lato distale del nervo usando un ago per sollevare il nervo esposto. Inserire la micropipetta di vetro nel sito di
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