Somministrazione sostenuta del fattore di crescita nervoso utilizzando un film di silicio poroso in cellule di feocromocitoma di ratto 12

Iniziare con il feocromocitoma 12 di ratto o le cellule PC12 nei terreni di crescita di base.

Prendi un pozzetto rivestito di collagene contenente mezzi di differenziazione e posiziona le cellule al suo interno.

Incubare per facilitare l'adesione cellulare.

Prendi un silicio poroso nanostrutturato degradabile o una pellicola PSi.

I pori del film sono caricati con il fattore di crescita nervoso o NGF, che viene adsorbito attraverso interazioni elettrostatiche tra l'NGF caricato negativamente e la superficie PSi caricata positivamente.

Posizionare la pellicola PSi caricata con NGF all'interno del pozzetto e incubare.

Cambiare i supporti a intervalli regolari.

L'NGF all'interno del film PSi viene rilasciato nel mezzo per diffusione e quando l'impalcatura di silicio si degrada.

Questo sistema di rilascio consente un rilascio prolungato di NGF a una velocità controllata per un periodo prolungato.

Gli NGF interagiscono con la cellula PC12, consentendone la sopravvivenza e facilitando la crescita e la ramificazione dei neuriti.

Seminare una volta da 10 a 10 celle per centimetro quadrato di area di lavoro su piastre rivestite di tipo colligeno in presenza di mezzo di differenziazione. Posizionare le piastre nell'incubatrice.

Dopo 24 ore a 37 gradi Celsius, aggiungere a ciascuna piastra un beta NGF murino fresco o un supporto in silicio poroso caricato con NGF e rimettere le piastre nell'incubatore.