JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:19 min. • August 29th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato con il cranio esposto.
Il cranio presenta una craniotomia sopra l'osso interparietale, a sinistra della linea mediana, e caudale alla sutura lambdoidea, con la dura madre rimossa per esporre il cervelletto.
Aspirare il cervelletto sinistro laterale per rivelare il nucleo cocleare dorsale sottostante o DCN, una struttura del tronco encefalico che contiene i neuroni che elaborano i segnali uditivi.
Aggiungere soluzione salina per prevenire la coagulazione del sangue ed eliminare il liquido residuo.
Posizionare una microsiringa contenente un vettore virale che codifica per l'opsina, un canale ionico sensibile alla luce.
Abbassare l'ago nel DCN.
Iniettare la sospensione virale a una velocità controllata, quindi ritirare l'ago.
Sutura l'incisione e lascia che il topo si riprenda.
Il virus iniettato si lega ai recettori neuronali DCN e subisce endocitosi.
All'interno del nucleo neuronale, il DNA virale innesca l'espressione genica, portando alla produzione di opsina.
Il modello è pronto per la stimolazione indotta dalla luce del percorso uditivo.
Utilizzare un tubo di aspirazione a cinque francesi per aspirare la porzione più laterale del cervelletto sinistro, sovra
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