Rigenerazione assonale nel nervo sciatico di un topo a seguito di una lesione da schiacciamento

Inizia con il nervo sciatico isolato da un topo.

I neuroni all'interno del nervo sono stati trasfettati per esprimere proteine citoplasmatiche fluorescenti.

Il nervo è stato schiacciato per indurre una lesione, che è stata contrassegnata con una sutura.

I segmenti assonali danneggiati nel sito degenerano e i macrofagi reclutati rimuovono i detriti.

Le cellule di Schwann proliferano per formare tracce guida e secernere fattori neurotrofici che promuovono la ricrescita degli assoni. Gli assoni si estendono lungo queste tracce, rigenerando il nervo.

Fissare il nervo per preservare le strutture cellulari, quindi rimuovere tutti i tessuti non neuronali attaccati.

Lavare con un tampone per eliminare i fissativi residui.

Posizionare il nervo su un vetrino da microscopio, applicare un mezzo di montaggio e posizionare un vetrino coprioggetti.

Appiattire il nervo per posizionare gli assoni all'interno dello stesso piano focale per l'imaging.

Utilizzando un microscopio a epifluorescenza, tracciare gli assoni dal sito di schiacciamento alle loro estremità distali per

misurare la lunghezza della rigenerazione.

Separare i DRG insieme alle radici nervose e al nervo sciatico, con attenzione con micro forbici