JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:30 min. • August 29th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato che esprime un gene marcatore fluorescente e fissato in una cornice stereotassica.
La testa è inclinata verso il basso per facilitare l'accesso alla cisterna magna, al liquido cerebrospinale o allo spazio riempito di liquido cerebrospinale tra il cervelletto e il tronco encefalico.
Applicare un unguento per gli occhi, radere il collo e sterilizzare.
Praticare un'incisione sulla linea mediana per esporre la membrana che copre la cisterna magna.
Ritrarre i tessuti con un separatore per accedere alla cisterna magna.
Prendi una microsiringa riempita con un farmaco induttore e dotata di un ago piegato.
Inserire l'ago e forare la membrana per raggiungere la cisterna magna.
Iniettare lentamente il farmaco per una dispersione uniforme all'interno del liquido cerebrospinale.
Il farmaco entra nelle cellule della superficie cerebrale e innesca l'espressione del gene marcatore, producendo proteine fluorescenti rosse.
Il flusso di liquido cerebrospinale impedisce la diffusione del farmaco nelle regioni cerebrali più profonde.
L'imaging a fluorescenza conferma la marcatura selettiva delle cellule di superficie, dimostrando una somministrazione mirata di farmaci nelle regio
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