Impianto di cannula nella Cisterna Magna in un modello murino

Inizia con un topo anestetizzato posizionato in una cornice stereotassica, la testa inclinata verso il basso per consentire un accesso più facile alla cisterna magna, uno spazio riempito di liquido cerebrospinale o CSF.

Un'incisione mediana del cuoio capelluto espone la cisterna magna, che appare come un triangolo rovesciato tra il cervelletto e il midollo, coperto dalla membrana durale.

Usa un batuffolo di cotone per pulire il liquido in eccesso dalla dura.

Usando una pinzetta, afferra una cannula vicino alla parte dell'ago.

Inserire l'ago ad angolo attraverso la dura madre al centro della cisterna magna, evitando la penetrazione nel cervelletto e nel midollo.

Pulisci il liquido cerebrospinale fuoriuscito.

Applicare l'adesivo sulla dura madre per fissare la cannula, quindi aggiungere un acceleratore di colla per un'adesione immediata.

Coprire l'incisione con una miscela di cemento e adesivo, seguita da un acceleratore di colla.

Il topo cannulato intracisternale è pronto per la somministrazione mirata di agenti terapeutici nel liquido cerebrospinale.

Fissare il mouse nel frame stereotassico, utilizzando l'arco intraneurale o l'arco zigomatico. Quindi, inclina leggermente la testa in modo che formi un angolo di 120 gradi rispetto al corpo.

Successivamente, applicare l'unguento oftalmico e riapplicarlo secondo necessità durante l'intervento chirurgico. Trova la cresta occipitale, che è la parte del cranio che sporge immediatamente sopra i muscoli del collo. Sollevare la pelle sovrastante con un paio di pinzette e tagliare un pezzo di pelle a forma di mandorla di circa un centimetro lungo la linea mediana.

Quindi, utilizzando la cresta occipitale come punto di riferimento, separare il tessuto connettivo superficiale per esporre i muscoli del collo sottostanti. Utilizzare tamponi di cotone o lance oculari per controllare l'eventuale sanguinamento risultante. Per procedere, separare i muscoli sulla linea mediana facendo scorrere con cura le pinzette lungo il centro del sito di incisione nell'asse anteriore e posteriore.

Quindi, con un paio di pinze curve in ciascuna mano, unisci le punte al centro vicino alla parte inferiore del cranio e tira da parte i muscoli per esporre la cisterna magna. La cisterna magna si presenta come un minuscolo triangolo rovesciato, delineato dal cervelletto sopra e dal midollo sotto. Usando una lancia chirurgica o un batuffolo di cotone, pulire la membrana durale che copre il CM.Quindi, con una pinzetta curva nella mano dominante, afferrare la cannula vicino all'ago coperto dal tubo.

Quindi, posiziona il dito medio dell'altra mano sulla barra auricolare per creare un appoggio stabile per la cannula. Ora, al centro del CM, forare la dura madre a 45 gradi rispetto alla testa del topo. Inserire l'ago solo nel punto in cui si trova lo smusso sotto la dura madre per evitare di penetrare nel cervelletto o nel midollo.

Se necessario, pulire il liquido cerebrospinale fuoriuscito con una lancia o un tampone. Quindi, applicare alcune gocce di cianoacrilato sulla membrana durale che circonda la cannula e aggiungere una goccia di acceleratore di colla per polimerizzare immediatamente la colla. Quindi, combina il cemento dentale e la colla cianoacrilica.

Quindi, coprire l'intero sito di incisione e applicare rapidamente una goccia di acceleratore di colla per polimerizzare.