Iniezione di cellule progenitrici neurali fluorescenti in organoidi cerebrali umani per la modellazione dei trapianti

Inizia con cellule progenitrici neurali derivate da cellule staminali pluripotenti indotte o NPC marcate in fluorescenza.

Risospendere le cellule in un idrogel di matrice extracellulare per creare una miscela uniforme cellula-matrice.

Incubare la miscela con ghiaccio.

Quindi, trasferisci un organoide cerebrale umano in un piatto.

Rimuovere il terreno in eccesso e posizionare la piastra al microscopio per la procedura di iniezione.

Erogare la miscela di matrice cellulare su un vetrino sterile pre-raffreddato e aspirarla utilizzando una siringa pre-raffreddata.

Iniettare lentamente la miscela sulla superficie dell'organoide per ridurre al minimo la rottura dei tessuti.

Lasciare riposare brevemente l'organoide, quindi aggiungere il terreno, trasferire l'organoide in una piastra a più pozzetti e incubare.

L'idrogel si solidifica, ancorando gli NPC nel sito di iniezione. Traccia gli NPC usando la microscopia a fluorescenza.

Nel corso del tempo, le NPC proliferano e migrano in regioni distanti dell'organoide, dove si differenziano in neuroni immaturi e maturi.

Ciò consente un trapianto di cellule affidabile con una minima interruzione degli organoidi, adatto per la terapia con cellule neurali.

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