Analisi istologiche ed ematologiche per valutare gli effetti del bacillo subtilis nei ratti sottoposti a stress termico

0 visualizzazioni2:34 min • November 28th, 2025

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Si inizia con sezioni intestinali colorate con ematossilina ed eosina di ratti sottoposti a stress termico, una pretrattata oralmente con tampone come controllo, e l'altra con una sospensione di Bacillus subtilis .

Lo stress termico danneggia le proteine della giunzione stretta intestinale, causando accorciamento delle villie e assottigliamento della mucosa.

Il pretrattamento con i batteri favorisce il rilascio di molecole segnalatrici che stabilizzano le proteine della giunzione stretta, preservando l'altezza delle villosità e lo spessore della mucosa.

Osserva le sezioni al microscopio luminoso ad alta risoluzione per identificare differenze nell'altezza delle villosità.

Successivamente, posiziona una goccia di sangue fresco da ogni ratto su vetri di vetro e copri con coprite.

Lo stress termico destabilizza le membrane degli eritrociti, rilasciando microvescicole nel flusso sanguigno.

I batteri riducono lo stress ossidativo sistemico, stabilizzando le membrane degli eritrociti e minimizzando la vesiculazione.

Osserva i campioni di sangue al microscopio lucico ad alta risoluzione per valutare le differenze nella vesiculazione.

L'altezza delle villosità preservata nella sezione intestinale e meno microvescicole nel sangue confermano l'effetto protettivo dei batteri sotto stress termico.

Dopo aver preparato e colorato le sezioni dell'intestino tenue secondo il protocollo testo, si utilizza un microscopio ad alta risoluzione per misurare le villosità intestinali e lo spessore totale della mucosa. Analizza almeno quattro campioni di ciascun ratto e effettua almeno 20 misurazioni in ciascun campione.

Per effettuare una microscopia lucica ad alta risoluzione dei campioni di sangue, si utilizza la piattaforma di isolamento da vibrazioni come base per il sistema di microscopio con una videocamera e un computer per registrare immagini in tempo reale. Dopo aver calibrato le immagini del test secondo il protocollo testuale, posizionare sette microlitri di sangue appena prelevato da ciascun ratto su un vetrino di vetro e aggiungere un sottotesto di copertura. Poi, fotografa e registra dieci fotogrammi di 72 per 53,3 micrometri quadrati per ogni campione.

Infine, utilizzando software che forniscono immagini ottiche ad alta risoluzione a vista diretta in tempo reale, misurano la concentrazione delle vescicole.

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Ultimo aggiornamento: 1 agosto 2026