Infarto acuto del miocardio in topi

Il modello di topo di infarto miocardico acuto (AMI) è utile per studiare la conseguenza di un infarto miocardico sulla funzione cardiaca fisiopatologici e fisiologici.

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di modellare l'infarto miocardico acuto nei ratti per lo studio dei meccanismi di segnalazione cardiaca associati alla risposta immediata del miocardio all'ischemia cardiaca, seguita da danno da riperfusione. Queste risposte includono le dimensioni dell'infarto, l'area a rischio e la morte cellulare. Il primo passo è quello di esporre il ventricolo sinistro praticando una piccola incisione in corrispondenza del quarto spazio intercostale del lato sinistro del torace e allargando le costole una volta isolate.

L'arteria discendente anteriore sinistra o LAD viene legata transitoriamente per 30 minuti dopo il periodo ischemico. La legatura del LAD viene rilasciata consentendo la riperfusione cardiaca dopo un periodo di riperfusione di quattro ore. Il LAD viene legato ancora una volta prima che il cuore venga asportato ed esaminato per le dimensioni dell'area del miocardio infartuato a rischio e non a rischio.

In definitiva, i risultati della valutazione istologica dell'infarto. Il miocardio può essere utilizzato per esplorare strategie terapeutiche per il trattamento dell'insufficienza cardiaca. Questa tecnica può fornire informazioni sui meccanismi di segnalazione associati alle risposte immediate all'ischemia, seguite da lesioni efficaci come le dimensioni dell'infarto, l'area a rischio e la morte cellulare.

Questo modello può essere utilizzato per valutare nuove strategie terapeutiche per il trattamento della cardiopatia ischemica. A dimostrare la procedura saranno un ricercatore senior associato e X, un senior postdoctoral fellow del laboratorio del Dr.Bradley McConnell nel Dipartimento di Scienze Farmacologiche e Farmaceutiche dell'Università di Houston, membro istituzionale del Texas Medical Center. Prima che la procedura chirurgica possa iniziare, la superficie operatoria deve essere disinfettata con etanolo al 70%.

Sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici con uno sterilizzatore a cordoni caldi prima di ogni singolo intervento chirurgico. Gli strumenti necessari includono due forbici chirurgiche, una pinza, una pinza curva, due portaaghi e un divaricatore toracico. Regolare la temperatura del sistema di coperte omeometriche in modo che mantenga la temperatura corporea dell'animale a 37 gradi più o meno un grado Celsius.

La dimensione di un infarto dipende dalla durata dell'occlusione e dalla temperatura corporea. Tieni a portata di mano una garza di cotone e applicatori per gestire il sanguinamento. In questi studi vengono utilizzati solo gli animali che superano un esame fisico mediante ispezione visiva, misurazione della frequenza cardiaca, della frequenza respiratoria, della temperatura corporea e del peso corporeo.

Registrare il peso e identificare le caratteristiche degli animali sani che saranno sottoposti a intervento chirurgico il giorno prima dell'intervento. Somministrare una dose di maschere alla buprenorfina. Camici e guanti devono essere indossati durante l'intera procedura e i guanti devono essere cambiati tra i singoli interventi chirurgici.

Per iniziare, anestetizzare un ratto e preparare il sito chirurgico radendo accuratamente il pelo dalle zone del collo e del torace. Disinfettare le aree rasate con la soluzione di Betadine, seguita da etanolo al 70%. Ripetere questa procedura tre volte.

Posizionare l'animale su un sistema di coperte omeotematiche per un corretto mantenimento della temperatura corporea. Sdraiato sul fianco destro. La smussatura dei bordi di un tubo di polietilene facilita l'inserimento nella laringe.

Inserire il tubo endotracheale con l'ausilio di uno stereomicroscopio operatorio. Manipolare delicatamente la lingua secondo necessità e tenere d'occhio la trachea. Collegare il tubo endotracheale a un ventilatore che pedala a 80 respiri al minuto e un volume corrente di 1,2 millilitri per 100 grammi di peso corporeo.

Una volta ottenuta la ventilazione meccanica, posizionare un telo sterile sul ratto lasciando esposta solo l'area chirurgica. Una volta stabilita una respirazione costante, aprire il torace nel quarto spazio intercostale sinistro. Ridurre al minimo il grado di taglio nel tessuto per ridurre il rischio di sanguinamento.

Posizionare un divaricatore toracico all'interno del quarto spazio intercostale e allargare le costole per esporre il ventricolo sinistro o il ventricolo sinistro deve essere prestato attenzione a non danneggiare il polmone. Quindi, apri il pericardio, lasciandolo in posizione. Se possibile, identificare l'arteria discendente anteriore sinistra prossimale o LAD con l'uso di uno stereomicroscopio chirurgico.

Transitoriamente, legare o legare con un nodo scorsoio il LAD per indurre l'ischemia. Facendo attenzione a non esteriorizzare il cuore vero e proprio. La legatura LAD è confermata dall'osservazione dello sbiancamento del tessuto miocardico distale alla sutura, nonché della disfunzione della parete anteriore durante il periodo ischemico.

Dopo un periodo ischemico di 30 minuti, iniziare la riperfusione cardiaca tagliando o rilasciando la legatura attorno al LAD con le forbici microchirurgiche. La riperfusione è verificata dal ritorno del colore rosso nel tessuto miocardico e dalla dimostrazione di un certo recupero del movimento della parete anteriore osservata immediatamente dopo il rilascio della legatura LAD. La procedura è identica per i ratti di controllo fittizi, tranne per il fatto che il LAD non è legato transitoriamente.

Rimuovere il divaricatore toracico e tirare le costole insieme con un modello di sutura interrotto. Una volta chiuse le costole, creare una pressione toracica negativa per garantire una respirazione corretta aspirando aria dalla cavità toracica. Infine, chiudere la pelle con un modello di sutura continuo Dopo l'intervento chirurgico, posizionare il ratto in una gabbia con un termoforo riscaldante e monitorare la temperatura corporea con un termometro rettale, la frequenza respiratoria con l'ispezione visiva, la frequenza cardiaca con palpitazioni e segni anomali di dolore fino a quando l'animale non diventa deambulante.

Deve essere somministrata soluzione fisiologica sterile. Se si osservano segni di disidratazione, somministrare buprenorfina immediatamente dopo l'intervento chirurgico. Dopo un periodo di riperfusione di quattro ore, riposizionare il ratto rianestetizzato nell'area chirurgica.

Visualizza il ventricolo sinistro come dimostrato in precedenza e lega il LADA una seconda volta o il nodo scorsoio può essere ritirato. Iniettare un millilitro di blu di Evans al 5% e soluzione salina nella camera ventricolare destra e lasciare perfondere per due minuti. Trascorso questo periodo, iniettare un millilitro di soluzione satura di cloruro di potassio nella camera ventricolare destra per impedire al cuore di battere rapidamente, asportare il cuore e incorporarlo in soluzione salina tamponata con agro fosfato riscaldato al 2%.

Una volta che l'agro si solidifica a temperatura ambiente, tagliare il cuore in sezioni di uno o due millimetri. Colorare il miocardio vitale con il 2% di trien tetra oleum cloruro o TTC per 20 minuti e catturare un'immagine di ogni fetta vista. Ecco un'immagine rappresentativa del cuore di topo.

Dopo quattro ore di riperfusione, l'area in blu rappresenta l'area non occlusa o non a rischio. Le aree rosse indicano l'area a rischio di infarto e le aree bianche gialle denotano il miocardio infartuato all'interno dell'area a rischio. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come comportarti nell'infarto miocardico acuto nei ratti e nel modello animale utilizzato per imitare la cardiopatia ischemica umana.

Questo modello può essere utilizzato per studiare le risposte immediate all'ischemia, seguite da un danno da riperfusione che si verifica entro le prime ore, come le dimensioni dell'infarto, il rischio di area e la morte cellulare. Come osservi in questo video, buona fortuna con i tuoi esperimenti.