Labirinto di Barnes: un metodo per valutare l'apprendimento spaziale e la memoria negli animali da laboratorio

Il Labirinto di Barnes è una piattaforma circolare con fori equidistanti attorno al bordo e una scatola di fuga sotto un foro bersaglio. Gli animali da laboratorio navigano attraverso il labirinto per trovare il buco bersaglio e fuggire da stimoli avversi innati come spazi aperti e luci intense.

Per iniziare, posiziona il soggetto, ad esempio un topo, al centro del labirinto sotto una camera buia. Quindi, solleva la camera e rilascia l'animale nell'arena. Per motivare il soggetto a entrare efficacemente nel foro bersaglio, utilizzare uno stimolo leggermente avversivo come il suono ultrasonico.

La prova termina quando il mouse entra nel foro di destinazione o è trascorso un tempo predefinito. L'apprendimento spaziale e la memoria vengono misurati durante ogni prova registrando il numero di buche esplorate dal soggetto e il tempo impiegato per completare la prova, oltre a mappare il percorso dell'animale e la navigazione spaziale.

Prima di iniziare la procedura di test del labirinto Barnes, pulire tutti i componenti del labirinto con acqua ed etanolo al 70%. Quando i componenti sono asciutti, assembla il labirinto e assegna casualmente a ciascun mouse un foro di destinazione da utilizzare durante il periodo di test.

I fori possono essere etichettati da 1 a 20 sul fondo del labirinto o all'esterno del perimetro del labirinto dove non sono visibili dall'interno del labirinto. Per iniziare un test di allenamento, sostituire il disco del foro assegnato con una scatola nera di 23 x 11 centimetri e utilizzare elastici e ganci per fissare saldamente la scatola al labirinto.

Quindi, posiziona un mouse al centro del labirinto di Barnes sotto una tazza e lascia che il mouse si acclimati per 30 secondi. Al termine del periodo di acclimatazione, iniziare la registrazione video e accendere la luce e il rumomotore ad ultrasuoni.

Solleva la tazza tramite un meccanismo a corda per evitare di distorcere la direzione iniziale dell'animale e avvia un timer dietro una tenda di osservazione. Traccia i movimenti dell'animale su un pezzo di carta con un diagramma del labirinto e usa il diagramma per analizzare le strategie di ricerca del topo e per determinare il numero di buchi che sono stati esplorati nel quadrante opposto al bersaglio.

Quando il mouse entra nel foro di destinazione, coprire il foro con un legante opaco pesante e spegnere il rumoroso a ultrasuoni. Se il topo non è entrato nel bersaglio dopo 5 minuti, rinchiudere l'animale nel foro del bersaglio. Quindi, lasciare che il mouse rimanga nella casella di destinazione per 1 minuto indisturbato, assicurandosi di disattivare il rumore ultrasonico. Quindi, riporta l'animale nella sua gabbia.

Quando tutti i topi sono stati testati, rivedere manualmente la loro registrazione per tenere traccia del movimento complessivo del topo per determinare il numero di fori errati esplorati prima e dopo il rilevamento del bersaglio, nonché il numero di fori dal foro di destinazione al primo foro esplorato e qualsiasi comportamento di toelettatura degno di nota.