0 visualizzazioni • 3:50 min. • April 30th, 2023
Per iniziare, somministrare un'iniezione di scopolamina e terbutalina per ridurre al minimo gli effetti collaterali periferici della pilocarpina. Successivamente, somministrare un'iniezione di soluzione di pilocarpina per indurre lo stato epilettico o SE. La pilocarpina altererà l'eccitabilità neuronale del cervello.
Subito dopo, posiziona il mouse in un'incubatrice calda e monitora l'induzione di SE. Cerca di annuire con la testa e i movimenti ritmici delle zampe anteriori o qualsiasi comportamento di stadio 3 o superiore sulla scala di Racine. Quindi, metti il topo in un'incubatrice a temperatura ambiente e continua a monitorare il comportamento dell'animale.
Successivamente, somministrare un'iniezione di soluzione di diazepam per porre fine all'SE. Infine, somministrare un'iniezione di soluzione di destrosio per favorire il recupero dell'animale. Dopo l'induzione di SE, l'animale entra in un periodo di latenza libero da crisi fino all'insorgenza di crisi epilettiche ricorrenti spontanee.
Inizia pesando ogni topo maschio di 8 settimane. Preparare 2 milligrammi per chilogrammo di scopolamina e terbutalina e 280 milligrammi per chilogrammo di soluzione di pilocarpina. Quindi, iniettare la soluzione per via intraperitoneale in ciascun topo e riportare i topi nelle loro gabbie.
30 minuti dopo la somministrazione di scopolamina e terbutalina, iniettare la soluzione di pilocarpina in ciascun topo. Immediatamente dopo l'iniezione di pilocarpina, mettere i topi in un'incubatrice a 28-30 gradi Celsius per l'osservazione. Successivamente, monitorare il comportamento dei topi fino a quando non viene indotto lo stato epilettico o SE. Se vengono rilevate crisi motorie limbiche che corrispondono allo stadio 3 o superiore secondo la scala di Racine, registrare l'ora e monitorare i topi.
Una volta che le crisi motorie continue durano più di 2 minuti, posizionare il topo in una nuova gabbia a temperatura ambiente e continuare a monitorare per 3 ore per determinare se le convulsioni continuano e se la SE è indotta. Quindi, terminare le crisi acute comportamentali a 3 ore dopo l'insorgenza di SE iniettando 10 milligrammi per chilogrammo di soluzione di diazepam. Dopo l'iniezione di diazepam, somministrare 1 millilitro di destrosio al 5% per singolo topo per favorire il recupero.
Al giorno 1 dopo l'induzione SE, pesare i topi e tenerli nell'incubatrice per un giorno in più. Al giorno 2 dopo l'induzione SE, pesare i topi e rimetterli nella loro gabbia di casa. Fornire cibo umido per facilitare il recupero. Infine, misurare il peso corporeo giornaliero degli animali fino a 7 giorni dopo la pilocarpina e, se il peso corporeo non è aumentato, iniettare nei topi il 5% di destrosio.