Perfusione epatica murina in vivo: un metodo per infondere il fegato del roditore con una soluzione attraverso la vena porta

Dopo aver anestetizzato e preparato il roditore, individuare la vena porta e far scorrere un filo sotto di essa. Fai un nodo sciolto attorno alla vena porta senza tenderla. Questo stabilizzerà un catetere IV più avanti durante il protocollo.

Tenendo l'ago di un catetere IV smussato verso l'alto e parallelo alla vena porta, inserirlo nel lume, lo spazio all'interno della vena. Ritrarre l'ago e spingere il catetere attraverso la vena fino all'area venosa ramificata all'interno del fegato.

Dopo aver stabilizzato il catetere, aumentare la velocità della pompa peristaltica. Immediatamente, il fegato dovrebbe sbiancare poiché il sangue viene sostituito dal liquido di perfusione. Tagliare un vaso sanguigno importante per drenare ancora più sangue e liquido di perfusione dal fegato.

Stringi il vaso reciso alcune volte per gonfiare il fegato e assicurarti che sia completamente privo di sangue. Cambiare la pompa in modo che perfonda il tampone nel fegato. Infine, ripetere brevemente il gonfiaggio del fegato, facendo attenzione a non far scoppiare il fegato dal suo tessuto connettivo.

Per posizionare il catetere della vena porta, in primo luogo, utilizzare la parte posteriore di una pinza per