Isolamento delle cellule mesoteliali: una tecnica per isolare le cellule mesoteliali primarie da un campione di tessuto di omento umano

Le cellule mesoteliali primarie umane, o HPMC, rivestono molti organi viscerali come l'omento o lo strato di tessuto adiposo presente nella cavità peritoneale.

Per isolare le cellule mesoteliali, iniziare immergendo un campione di omento umano in un tampone adatto per rimuovere i globuli rossi o i globuli rossi in eccesso. Quindi, metti l'omento in un piatto di vetro e tritalo a pezzi. Questo dissocia il tessuto, rilasciando HPMC insieme ai globuli rossi contaminanti.

Trasferite i pezzi in un tubo conico e lasciateli riposare per il tempo desiderato. Il tessuto tritato ricco di grasso a bassa densità sale verso l'alto, mentre i componenti cellulari densi si depositano sul fondo. Quindi, aspirare il liquido sul fondo, contenente HPMC e RBC, in una nuova provetta.

Centrifuga per raccogliere le cellule. Rimuovere il surnatante contenente tampone. Risospendere il pellet in un terreno di coltura mesoteliale e incubare per la durata desiderata. Il terreno facilita la crescita selettiva degli HPMC rispetto ai globuli rossi.

Osserva le cellule usando un microscopio ottico per confermare la crescita delle cellule mesoteliali umane di forma cuboidale.

Dopo l'acquisizione di un campione chiru