Modellazione del cancro basata sulla membrana corioallantoica del pollo: un modello in ovo per studiare la tumorigenesi e le metastasi delle cellule tumorali

La membrana corioallantoidea del pollo, o CAM, è una membrana altamente vascolarizzata che si trova nelle uova di alcuni vertebrati come i polli. Questa membrana extra-embrionale riveste una membrana a guscio non vascolare e funge da sito di scambio di ossigeno gassoso e anidride carbonica tra l'embrione e l'ambiente.

Per generare un modello di cancro CAM, iniziare con un uovo di gallina fecondato e vitale che porta una CAM completamente sviluppata con un guscio parzialmente aperto che espone la sua vascolarizzazione ramificata. Verificare che il CAM sia staccato dalla membrana del guscio.

Posiziona un anello antiaderente sterile su un punto di diramazione dei vasi sanguigni. Usando una bacchetta di vetro, strofinare delicatamente la membrana all'interno dell'anello per raschiare il suo strato epiteliale esterno ed esporre lo strato mesodermico sottostante che trasporta il sistema vascolare. Pipetta: una sospensione raffreddata di cellule tumorali mescolate con una matrice extracellulare adatta nell'anello. L'anello limita la dispersione cellulare.

Lascia che la matrice si solidifichi per fissare le cellule all'interno. Sigillare l'apertura del guscio d'uovo e incubare l'uovo in co