Caratterizzazione della chemioresistenza funzionale: un metodo per valutare la resistenza ai farmaci nelle cellule tumorali utilizzando il saggio clonogenico

Per valutare la chemioresistenza nelle cellule tumorali, iniziare prendendo una piastra a più pozzetti. Seminare una sospensione delle cellule tumorali della prostata sensibili ai farmaci desiderate in alcuni pozzetti e una sospensione della variante resistente ai farmaci delle cellule nei pozzetti rimanenti.

Incubare la coltura per facilitare l'adesione delle cellule alla piastra di coltura. Trattare entrambi i tipi di cellule con una gamma di dosi crescenti della soluzione farmacologica selezionata. Le molecole del farmaco entrano nelle cellule sensibili e causano la morte cellulare anche alle loro concentrazioni più basse. Tuttavia, le cellule resistenti espellono le molecole del farmaco attraverso pompe specializzate per l'efflusso del farmaco, consentendo la loro sopravvivenza nonostante siano esposte a concentrazioni di farmaco più elevate.

Aspirare il terreno esaurito contenente detriti e soluzione farmacologica. Integrare con terreni di crescita freschi e privi di farmaci. Incubare per consentire alle cellule resistenti ai farmaci sopravvissute di proliferare e formare colonie. Aggiungere una soluzione colorante adatta per colorare le colonie di cellule vive.

Lavare la colt