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Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 3:40 min • April 30th, 2023
Per iniziare, prepara un topo soppresso in posizione supina. Blocca uno dei suoi piedi per estendere l'arto verticalmente. Tenere delicatamente la pelle dell'arto inferiore.
Successivamente, rimuovere chirurgicamente la pelle e la fascia, lo strato di tessuto connettivo sciolto appena sotto la pelle, esponendo il ventre muscolare sottostante dell'arto inferiore.
Identificare il muscolo gastrocnemio - un grande muscolo superficiale a due teste - sull'arto inferiore posteriore. Origina dai condili laterali e mediali del femore posteriore e si attacca al calcagno - l'osso del tallone - attraverso il tendine calcaneare.
Tenere l'estremità distale del muscolo e tirare la pancia muscolare verso la sua origine. Asportare il tendine calcaneare del gastrocnemio seguito dal muscolo all'origine più vicino al femore.
Ora, individua il muscolo tibiale anteriore. Il muscolo origina dalla superficie anterolaterale della tibia e si attacca all'osso cuneiforme mediale attraverso il tendine distale.
Staccare il ventre del muscolo tibiale dal tessuto connettivo sottostante. Tagliare il tendine distale e il muscolo all'origine più vicino alla tibia.
Infine, trasferire i muscoli asportati in criotubi. Conservare le provette a basse temperature fino a un'ulteriore analisi a valle.
Per evitare la contaminazione del pelo, spruzzare etanolo al 70% su tutto il corpo. Quindi, posiziona l'animale su un lettino di dissezione in posizione supina e attacca un arto posteriore a un morsetto per buretta rialzato per estendere l'arto verticalmente. Usando il forcipe Dumont, afferra la pelle superficiale dell'arto posteriore e usa le forbici sottili curve per rimuovere delicatamente la pelle e la fascia, esponendo il ventre muscolare sottostante dell'arto inferiore.
Identificare il muscolo gastrocnemio sull'arto inferiore posteriore in base alla sua origine ai condili laterali e mediali sul femore posteriore e alla sua inserzione nel calcagno attraverso il tendine calcaneare. Usa la pinza per afferrare l'estremità distale del gastrocnemio e tirare il ventre muscolare verso la sua origine. Quindi, usa le forbici per tagliare il muscolo all'origine il più vicino possibile al femore e trasferisci il muscolo in un piatto pre-pesato.
Pesare immediatamente il piatto e trasferire il muscolo in una crioprovetta pre-etichettata. Successivamente, identificare il muscolo tibiale anteriore dalla sua origine sulla superficie anterolaterale della tibia e la sua inserzione nel cuneiforme mediale attraverso il suo tendine distale. Quindi, afferrare il piede per le dita con l'indice e il pollice e inserire la punta della pinza Dumont immediatamente sotto il tendine distale superficiale del tibiale.
Muovi la pinza in modo tale che il lato smussato possa essere utilizzato per staccare il ventre del muscolo tibiale dal tessuto connettivo sottostante e usa le forbici curve sottili per tagliare il tendine distale. Quindi, tagliare il muscolo all'origine il più vicino possibile alla tibia.
In questo articolo viene descritta una procedura chirurgica per isolare i muscoli gastrocnemio e tibiale anteriore da un topo sottoposto a eutanasia. Il metodo comprende passaggi dettagliati per l'identificazione, l'escissione e la conservazione dei muscoli per ulteriori analisi.
L'isolamento preciso del tessuto muscolare scheletrico consente analisi biochimiche e istologiche affidabili nei studi preclinici. Questa procedura supporta la validazione degli obiettivi fornendo campioni di tessuto ad alta integrità per la riduzione del rischio meccanicistica dei percorsi correlati ai muscoli. Tecniche di escissione riproducibili migliorano la prontezza del saggio e la coerenza dei dati attraverso i flussi di lavoro di scoperta.
Questo metodo si inserisce nel percorso di scoperta che va dall'identificazione del bersaglio alla validazione preclinica, consentendo il reperimento affidabile di tessuti per saggi funzionali.
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Ultimo aggiornamento: 29 agosto 2026