Congelamento rapido del tessuto muscolare per il sezionamento: un protocollo per ottenere sezioni ultrasottili di tessuto muscolare murino rapidamente congelato
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0 visualizzazioni • 3:30 min. • April 30th, 2023
Il congelamento rapido è una tecnica mediante la quale i campioni di tessuto vengono rapidamente congelati a temperature ultrafredde. Aiuta a mantenere la struttura nativa del DNA, dell'RNA e delle proteine all'interno del tessuto.
Per congelare il muscolo dell'arto, inizia prelevando il tessuto muscolare appena estratto dall'arto posteriore di un topo.
Quindi, prendi l'azoto liquido in una scatola di polistirolo e immergi un becher contenente isopentano - un liquido altamente conduttivo - nell'azoto liquido.
Congelare l'isopentano fino a quando la soluzione diventa viscosa. Contemporaneamente, applicare una goccia di liquido di congelamento su un pezzo di sughero.
Posizionare il tessuto muscolare degli arti posteriori tenendo il tendine e incorporare il pezzo di tessuto verticalmente nel mezzo di congelamento liquido. Questo orientamento aiuta nella successiva determinazione dell'area della sezione trasversale del muscolo.
Immergere brevemente il pezzo di sughero con il tessuto muscolare attaccato nel bagno di isopentano pre-raffreddato. Questo aiuta nel congelamento rapido e uniforme del tessuto muscolare.
Il mezzo di congelamento si solidifica a bassa temperatura e forma uno str
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