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0 visualizzazioni • 5:01 min. • April 30th, 2023
La lamina propria intestinale, situata al di sotto dell'epitelio intestinale, è costituita da tessuto connettivo lasso insieme a una fitta rete di fibre di collagene contenente una vasta gamma di cellule come fibroblasti, cellule mononucleate, inclusi linfociti e monociti. Queste cellule svolgono un ruolo cruciale nel mantenimento dell'omeostasi.
Per isolare le cellule mononucleate, inizia prelevando frammenti di colon di topo. Trattare i frammenti con un tampone digestivo contenente enzimi collagenasi. Gli enzimi collagenasi digeriscono le fibre di collagene all'interno del tessuto, rilasciando le cellule in sospensione.
Raccogliere il surnatante e filtrarlo attraverso filtri cellulari per rimuovere il tessuto non digerito e i detriti e ottenere una sospensione unicellulare. Aggiungere un tampone refrigerato al filtrato per inattivare gli enzimi collagenasi.
Centrifugare per separare le celle. Scartare il surnatante contenente gli enzimi e risospendere il pellet cellulare in un mezzo di separazione a base di silice a bassa densità. Successivamente, sovrapporre la sospensione su un mezzo di separazione a base di silice ad alta densità per creare un gradiente di separazione.
Centrif
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