Isolamento delle cripte intestinali: un metodo per isolare intere cripte dall'intestino tenue del modello murino

0 visualizzazioni • 4:37 min. • April 30th, 2023

Il rivestimento intestinale è ricoperto da sporgenze o villi e invaginazioni o cripte. Le cripte sono le ghiandole intestinali che secernono principalmente enzimi digestivi.

Per isolare le cripte intestinali tenue, iniziare posizionando un topo anestetizzato in posizione supina su una tavola di dissezione. Usando le forbici, sezionare longitudinalmente il peritoneo per esporre l'apparato digerente.

Individua l'intestino tenue e tiralo delicatamente verso l'alto dal corpo del topo. Taglia l'intestino alla base. Trasferire l'intestino raccolto in una pirofila contenente un tampone adatto. Tagliare longitudinalmente l'intestino, esponendo il lume.

Posiziona l'intestino, con il lato luminale rivolto verso l'alto, su un tagliere per esporre i villi. Sposta uno scivolo di vetro angolato sulla superficie intestinale per raschiare via i villi, esponendo l'intera cripta.

Taglia l'intestino in piccoli pezzi e trasferisci i pezzi in un tubo contenente un tampone ghiacciato per garantire il minimo danno alle cripte.

Successivamente, trattare con EDTA e incubare. L'EDTA provoca l'allentamento dell'intera cripta dal rivestimento intestinale. Rimuovere la soluzione esaurita contenente EDTA. Aggiu

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Cripte dell'intestino tenue