Inoculazione intramucosa di cellule tumorali in modello murino: una procedura per stabilire un modello murino di cancro ortotopico della testa e del collo

Durante l'inoculazione intramucosa ortotopica, le cellule tumorali che corrispondono all'istotipo del tessuto mucoso vengono consegnate nel tessuto mucoso di un animale ricevente.

Per iniziare, trattieni un topo anestetizzato per il collo su una piattaforma chirurgica per un più facile accesso alla bocca.

Preparare una sospensione di cellule tumorali altamente metastatizzanti in una matrice di membrana basale raffreddata in una siringa. La bassa temperatura impedisce alla sospensione di solidificarsi.

Iniettare con cautela questa sospensione nella guancia interna o nella regione vestibolare del topo. La regione buccale è rivestita dalla mucosa buccale, che è circondata da una rete di vasi sanguigni e linfatici.

Garantire l'erogazione completa della sospensione di cellule tumorali e ritrarre delicatamente l'ago. Lascia che la matrice si solidifichi e incastri le cellule all'interno.

Consenti al mouse di riprendersi. Entro pochi giorni dall'iniezione, un tumore primario si sviluppa nel sito di iniezione. Alla fine, le cellule di questo tumore con un alto potenziale metastatico possono viaggiare attraverso il sistema linfatico e stravasare nei linfonodi.

Queste cellule tumorali si adattano al loro nuovo microambiente e proliferano e stabiliscono colonie metastatiche nei linfonodi.

Immediatamente prima dell'iniezione, mescolare le cellule con un rapporto di sospensione di cellule tumorali 1 a 1 rispetto alla matrice della membrana basale su ghiaccio. Caricare una siringa da 0,5 millilitri dotata di un ago da 23G con 100 microlitri di cellule per animale ricevente. Posizionare le siringhe sul ghiaccio e confermare la mancanza di risposta al pizzicamento delle dita dei piedi in un topo anestetizzato.

Quindi, inserire l'ago nella regione buccale destra o sinistra attraverso lo spazio aperto disponibile su entrambi i lati della bocca, mantenendo la siringa parallela alla regione vestibolare mentre si trova all'interno della cavità orale, per facilitare l'iniezione dell'intero volume di 100 microlitri della sospensione della matrice della membrana basale cellulare per un periodo di 5 secondi. Tenere la siringa in posizione per altri 5 secondi per assicurarsi che tutto il materiale sia stato iniettato prima di estrarre delicatamente la siringa. I tumori diventeranno grossolanamente visibili in circa una settimana.

• Orthotopic Intramucosal Inoculation - Delivery of tumor cells into mice's mucosal tissue.
• Murine Model - An experimental approach utilizing mice for scientific studies.
• Neoplasia Intra-mucosa - The stage of cancer growth confined within the mucosal layer.
• Intramucosal Injection - A specialized procedure of injecting substances, often cells, into the mucosa.
• Orthotopic Mouse Model - A lab mouse model offering a biologically relevant environment for cancer studies.

• Introduce Orthotopic Intramucosal Inoculation - A way to study tumor development and metastasis (e.g., neoplasia intra-mucosa).
• Key Concepts - The murine model provides a platform for these injections (e.g., murine model).
• Underlying Mechanisms - The injected cancer cells adapt to their new environment and proliferate.
• Connect to Experiment - During this process, cancer cells metastasize through the lymphatic system.

• [Question 1] How is orthotopic intramucosal inoculation used in the murine model?
• [Question 2] What happens after the intramucosal injection?
• [Question 3] How does this process contribute to the understanding of metastasis?

• Practical Applications - Aids in developing more effective cancer treatments (e.g., tumor inoculation).
• Industry Impact - Holds value in pharmaceutical and biomedical research sectors (e.g., cell inoculation).
• Societal Importance - Contributes to the global fight against cancer (e.g., orthotopic mouse model).
• Link to Scientific Advancements - Drives innovation in oncology studies and drug development.