Modello di membrana corioallantoidea di pollo o tumore CAM: un metodo in ovo per simulare l'invasione perineurale delle cellule tumorali

In alcuni tumori metastatici, le cellule tumorali si estendono lontano dal sito di origine e penetrano nei tessuti nervosi, un fenomeno chiamato invasione perineurale o PNI.

La PNI può essere dimostrata in ovulo sulla superficie della membrana corioallantoidea o CAM, che imita la membrana basale del tessuto epiteliale umano.

Per iniziare, prendi un uovo di gallina vitale e fecondato con il guscio parzialmente aperto, esponendo una CAM completamente sviluppata.

Quindi, isola i gangli della radice dorsale o DRG dal midollo spinale di un topo. DRG è un gruppo di neuroni sensoriali con cui le cellule tumorali invadono lo spazio perineurale.

Incubare i DRG in un terreno adatto con un colorante fluorescente per etichettarli e visualizzarli facilmente. Ora, trasferisci il DRG sulla superficie della CAM senza rompere la membrana.

Copri l'uovo con una pellicola trasparente per evitare la contaminazione microbica. Successivamente, incubare l'uovo per facilitare l'integrazione del DRG nel CAM.

Dopo l'incubazione, seminare le cellule tumorali marcate in modo fluorescente su una superficie asciutta di CAM, lontano dal DRG. La superficie asciutta riduce al minimo la diffusione delle cellule tumo