Modellazione del trattamento intratumorale con inibitori dei miRNA: un metodo per analizzare l'effetto degli inibitori dei miRNA sulla crescita tumorale nel modello murino

Gli inibitori dei miRNA sono piccole molecole di RNA a singolo filamento chimicamente modificate che si legano ai miRNA endogeni e ne reprimono l'attività.

Per modellare l'effetto del trattamento intratumorale utilizzando inibitori dei miRNA, iniziare assumendo una sospensione di cellule tumorali marcate con enzimi bioluminescenti. Aggiungere una matrice di membrana basale liquefatta alla sospensione delle cellule tumorali.

Caricare la miscela risultante in una siringa. Iniettarlo per via sottocutanea nel fianco sinistro di un topo nudo immunodeficiente. Consenti alle cellule tumorali di crescere e formare un tumore.

In concomitanza, preparare una miscela di trattamento aggiungendo nanoparticelle lipidiche - un agente di rilascio in vivo - alla provetta contenente la soluzione di miRNA-inibitore. Incubare la miscela di trattamento per consentire l'incapsulamento dei miRNA-inibitori nelle nanoparticelle lipidiche.

Iniettare la miscela di trattamento direttamente nel tumore. Le nanoparticelle lipidiche rilasciano miRNA-inibitori all'interno della cellula tumorale. Una volta all'interno, i miRNA-inibitori si legano a specifici miRNA oncogenici, impedendo loro di ibridarsi con i loro m