Definizione di un modello di co-coltura tridimensionale dei gangli della radice dorsale murina e delle cellule tumorali: un modello in vitro per studiare l'invasione delle cellule tumorali perineurali

L'invasione perineurale o PNI si riferisce alla migrazione delle cellule tumorali lungo i nervi e alla loro successiva invasione nel perinevrio, un microambiente adatto per la crescita e la metastasi del cancro.

Per imitare la PNI in vitro, iniziare aggiungendo una goccia di matrice extracellulare o di sospensione ECM su un piatto di coltura in modo che assuma la forma di un emisfero. Ora, incubare la piastra di coltura per rafforzare le caratteristiche strutturali e funzionali dell'impalcatura 3D.

Successivamente, posizionare con cura un ganglio della radice dorsale pre-raccolto o DRG, un gruppo di neuroni sensoriali, al centro della gocciolina semisolida della ECM. Incubare per incorporare il DRG all'interno della gocciolina ECM.

Successivamente, aggiungere un terreno di coltura adatto e incubare. L'ECM integrata con nutrienti favorisce la germinazione di DRG in piccole proiezioni nervose chiamate neuriti che crescono radialmente verso la circonferenza della gocciolina.

Rimuovere il terreno esaurito per preparare la gocciolina ECM per il test successivo. Cellule tumorali aderenti colorate in modo fluorescente del seme sopra la gocciolina. A causa della forma emisferica, le cellul