Modellazione dell'invasione neurale cancerosa in vitro: un metodo per la co-coltura dei gangli della radice dorsale e delle cellule tumorali

L'invasione neurale è il meccanismo delle metastasi tumorali in cui le cellule tumorali neurotrofiche dimostrano una capacità intrinseca di crescere dentro e intorno ai nervi. Per osservare questo fenomeno in vitro, in primo luogo, prendiamo un ganglio della radice dorsale murina isolato o DRG - un gruppo di corpi cellulari di neuroni sensoriali.

Posizionare il DRG in un mezzo ghiacciato per mantenerne la vitalità. Ora, trasferisci il DRG in una goccia di matrice extracellulare raffreddata o ECM, che funge da impalcatura tridimensionale attorno al DRG. Successivamente, seminare le cellule tumorali neurotrofiche nella ECM a una distanza appropriata attorno al DRG.

Consentire all'ECM di solidificarsi per incorporare il DRG e le cellule tumorali all'interno. Infine, aggiungere un terreno di coltura adatto alla ECM e incubare. I mezzi di crescita nutritivi e le proteine della MEC forniscono un microambiente ottimale per gli espianti.

Durante l'incubazione, l'interazione reciproca tra gli espianti promuove la germinazione di piccole proiezioni nervose o neuriti che crescono radialmente verso le cellule tumorali. Contemporaneamente, le cellule tumorali migrano unidirezionalmente lontano