Saggio del metiltiazolil tetrazolio o MTT: un test colorimetrico per misurare la resistenza ai farmaci attraverso la determinazione dell'attività metabolica nelle cellule tumorali

Il test del metil tiazolo tetrazolio o MTT consente la valutazione della vitalità cellulare basata sulla misurazione dell'attività metabolica cellulare.

Per iniziare il saggio, preparare una gamma di concentrazioni crescenti del farmaco di interesse. Aggiungere volumi uguali delle diverse concentrazioni di farmaco nei pozzetti di una piastra a più pozzetti.

Successivamente, pipettare una sospensione delle cellule tumorali parentali sensibili ai farmaci desiderate e delle loro varianti resistenti ai farmaci in un terreno adatto, ciascuna in una serie di pozzetti contenenti diverse concentrazioni di farmaco. Incubare la piastra.

In coltura, le cellule tumorali sensibili ai farmaci sono sensibili alle molecole del farmaco, portando alla morte cellulare anche a basse concentrazioni. Al contrario, le cellule tumorali resistenti ai farmaci sono insensibili alle molecole del farmaco, facilitandone la sopravvivenza e la proliferazione anche a concentrazioni di farmaco più elevate.

Trattare le cellule con la soluzione di MTT e incubare. L'MTT, un sale tetrazolio caricato positivamente, penetra facilmente nelle cellule metabolicamente attive. All'interno di queste cellule, gli enzimi ossidor