Modello di organoide tumorale della vescica: un metodo per il trapianto ortotopico di organoidi della vescica nella vescica murina ricevente

Gli organoidi tumorali derivati da pazienti sono tumori in miniatura sviluppati dall'organo genitore. Al momento del trapianto in un modello animale, questi organoidi conservano la maggior parte delle caratteristiche fenotipiche e genetiche del tumore originale, consentendo una terapia personalizzata del cancro. Ad esempio, gli organoidi del cancro della vescica si colorano positivamente per molti marcatori cellulari come il loro corrispondente tumore parentale.

Per sviluppare un modello di organoide tumorale, iniziare con una coltura di organoidi tumorali della vescica. Aggiungere la sospensione dell'enzima collagenasi alla coltura dell'organoide e incubare. La collagenasi scompone i componenti della matrice. Ora, aggiungere un terreno di coltura preriscaldato per rilasciare gli organoidi liberi in sospensione. Centrifugare a bassa temperatura per neutralizzare l'eventuale attività residua della collagenasi e ottenere il pellet organoide.

Scartare il surnatante contenente enzimi neutralizzati e componenti della matrice degradati e risospendere il pellet in un terreno fresco. Trasferire la sospensione di organoidi in un terreno di coltura contenente la matrice della membrana basale