Microiniezione endovenosa di nefrotossine nell'embrione di zebrafish: una tecnica per rilasciare agenti nefrotossici nel flusso sanguigno dell'embrione di zebrafish

La microiniezione endovenosa facilita la somministrazione di molecole di interesse nel flusso sanguigno di un animale ricevente. Per somministrare le nefrotossine in un embrione di zebrafish, per prima cosa, preparare una concentrazione appropriata della soluzione di nefrotossine desiderata.

Utilizzando una punta di caricamento in gel fine, caricare questa soluzione di nefrotossine in un ago per microiniezione con una punta angolare affilata. Sospendi l'ago verticalmente per consentire alla soluzione di nefrotossine di riempire la punta dell'ago per gravità. Ora, fissare l'ago per microiniezione caricato nel supporto di un micromanipolatore.

Successivamente, trasferire un embrione di zebrafish anestetizzato nello stampo prefabbricato per microiniezione. Allineare l'embrione nello stampo con la testa orientata all'interno del pozzetto e la coda fuori dal pozzetto, migliorando l'accessibilità alla coda per la microiniezione. Quindi, posiziona con precisione la punta dell'ago vicino all'embrione.

Iniettare la soluzione di nefrotossine nella vena caudale dell'embrione. Gli agenti nefrotossici iniettati si diffondono attraverso la circolazione e raggiungono organi distanti come il rene.