Generazione della finestra calvario nel modello murino: una procedura chirurgica per creare una finestra nella parte superiore del cranio del topo

0 visualizzazioni3:15 min • April 30th, 2023

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La calvaria è la parte superiore del cranio, che copre e protegge la cavità cranica, lo spazio vuoto all'interno del cranio che racchiude il cervello. È costituito da cinque ossa collegate da tessuto fibroso chiamato suture, comprese le suture coronali, sagittali e lambdoidee.

Per generare una finestra calvariale per l'accesso al cervello, per prima cosa, prendi un topo anestetizzato con la testa rasata.

Fissare l'animale su un'unità stereotassica, stabilizzando il suo cranio. Mantenere la temperatura corporea utilizzando un termoforo.

Quindi, sterilizzare il cuoio capelluto e praticare una piccola incisione lungo la porzione mediana centrale del cranio.

Successivamente, orientare la fresa perpendicolarmente alla bregma, il punto di intersezione delle suture coronali e sagittali.

Posizionare il trapano nell'area prevista, a una distanza adeguata dal bregma.

Avviare con cautela il trapano sul cranio, inumidendo il sito bersaglio per evitare danni ai tessuti dovuti all'accumulo di calore.

Forare con una profondità ridotta attraverso la calvaria per formare la finestra calvariale.

Una volta creata la finestra, il mouse può essere utilizzato per ulteriori procedure sperimentali.

Prima di iniziare la procedura, ruotare il blocco del tavolino sul trapano per consentire l'inserimento di un adattatore per punta da trapano e di una punta sterile da 1 millimetro nel trapano e serrare manualmente i blocchi della punta per bloccare il trapano. Fissare il trapano al telaio stereotassico.

Dopo aver confermato la mancanza di risposta al riflesso del pedale, posizionare il mouse anestetizzato sul telaio e utilizzare l'estremità smussata di un applicatore a punta di cotone per posizionare i denti nella depressione della barra boccale.

Premere la barra dell'orecchio sinistro contro il canto mediale dell'orecchio sinistro per stabilizzare il cranio e utilizzare la vite sul telaio stereotassico per bloccare il cranio in posizione. Quindi, fissa l'altro lato del cranio con la barra auricolare destra allo stesso modo.

Per creare una finestra calvariale, pulire il cuoio capelluto con tre scrub sequenziali alternati di betadina e etanolo al 70% e utilizzare un bisturi sterile per praticare un'incisione di 3 millimetri attraverso la pelle lungo la parte mediana centrale del cranio seguendo la linea di sutura sagittale.

Identificare e orientare la punta sterile perpendicolare al bregma, assicurandosi di azzerare la scala digitale del nonio, e spostare la punta del trapano di 2 millimetri lateralmente alla sutura sagittale e di 1 millimetro anteriormente alla sutura coronale.

Allontanare la pelle dal trapano e, utilizzando la massima velocità e prestando attenzione ai punti di riferimento, praticare con cura un foro profondo circa 0,5 millimetri attraverso la calvaria, raffreddando il sito di perforazione con gocce di soluzione fisiologica sterile, se necessario.

Una volta realizzata la finestra calvariale, sollevare con cautela il trapano e rimuovere il trapano dal telaio stereotassico.

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Ultimo aggiornamento: 1 agosto 2026