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Ricerca sul cancro
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Per isolare i nuclei, iniziare prelevando un campione di glioma fresco congelato - un tumore che ha origine nelle cellule gliali del cervello - in una capsula di Petri.
Posizionare la capsula di Petri sul ghiaccio per evitare la degradazione dei tessuti.
Quindi, tritare il campione di tessuto in piccoli pezzi.
Aggiungere un tampone di lisi pre-raffreddato ai pezzi di tessuto tritati. Trasferire il composto in un omogeneizzatore Dounce. Usando il pestello, omogeneizzare il tessuto per disintegrare le cellule e avviare la lisi.
A questo punto, trasferire l'omogeneizzato in una provetta per microcentrifuga contenente un tampone di lisi fresco.
Disgregare meccanicamente l'omogenato utilizzando un puntale per pipetta a foro largo. Questo passaggio facilita il rilascio di organelli citoplasmatici dalle cellule.
Successivamente, utilizzando un filtro cellulare di dimensioni adeguate, filtrare l'omogeneizzato in una provetta nuova per rimuovere i detriti tissutali e altri contaminanti.
Dopo la filtrazione, prelevare il filtrato contenente vari organelli cellulari.
Centrifugare il filtrato a bassa velocità per pellettare i nuclei più densi sul fondo mentre gli altri organelli cellulari rima
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