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0 visualizzazioni • 2:37 min. • April 30th, 2023
Per crioconservare un campione di cervello murino mediante congelamento rapido, iniziare prendendo un becher riempito con una soluzione di isopentano - un liquido altamente conduttivo - e immergerlo in un barattolo contenente azoto liquido.
Congelare l'isopentano fino a quando la soluzione diventa viscosa.
Nel frattempo, prelevare un campione intero di cervello di topo preceduto da una soluzione di saccarosio. Questo trattamento previene la deformazione del tessuto cerebrale nelle fasi successive.
Rimuovere il campione di cervello dalla soluzione di saccarosio e asciugarlo per rimuovere eventuali tracce di saccarosio.
Quindi, posiziona il cervello nell'orientamento desiderato in un criomold profondo contenente uno strato di terreno di inclusione.
Sovrapponi il cervello nel criopoldo con più mezzi di inclusione per assicurarti che l'intero organo sia coperto.
Quindi, immergere il criomold contenente il cervello incorporato nel bagno di isopentano pre-raffreddato. Il rapido raffreddamento del tessuto cerebrale a una temperatura ultra-bassa garantisce la conservazione dell'architettura cerebrale senza alcuna distorsione.
Ora, lasciare congelare il campione di cervello fino a quando il
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