Fissazione e colorazione di sezioni di tessuto crioconservate: una procedura per elaborare sezioni di tessuto cerebrale congelate per la microdissezione laser

Per differenziare specifiche popolazioni cellulari in un tessuto tumorale cerebrale eterogeneo di topo per il loro successivo isolamento, iniziare prendendo un vetrino che trasporta la sezione di tessuto tumorale cerebrale crioconservata di interesse.

Incubare in sequenza il tessuto in concentrazioni decrescenti di etanolo. L'etanolo dissolve il mezzo di inclusione che è penetrato nel tessuto e lo fissa mantenendo l'integrità dell'acido nucleico.

Inoltre, l'etanolo reidrata il tessuto, consentendo una colorazione uniforme durante le fasi successive.

Ora, tratta il tessuto con Cresyl violet. Il cresil violetto - un colorante basico - colora i componenti cellulari acidi come gli acidi nucleici.

Successivamente, controcolorare il tessuto con eosina Y. L'eosina Y - un colorante acido - colora i componenti cellulari di base come le proteine citoplasmatiche.

Questa fase di colorazione differenziale aiuta a distinguere tra il citoplasma e altre strutture cellulari, consentendo l'identificazione delle cellule di interesse.

Dopo la colorazione, immergere il tessuto in concentrazioni crescenti di etanolo per disidratare il tessuto ed evitare un'eccessiva distorsione del tessuto.

Quindi, lava