JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 3:05 min. • April 30th, 2023
In risposta a determinati attrattivi chimici rilasciati dai tumori solidi, le cellule immunitarie come i macrofagi associati al tumore o TAM si infiltrano nei tumori solidi. Successivamente, questi TAM facilitano la progressione del tumore.
Per studiare le interazioni tra TAM e cellule tumorali in vitro, iniziare prelevando una piastra multipozzetto con un inserto membranoso. Questa disposizione separa temporaneamente il pozzo in due compartimenti.
Quindi, aggiungere una sospensione di TAM al compartimento superiore del pozzetto del transwell.
Integrare il compartimento inferiore del pozzetto con un terreno condizionato arricchito con attrattivi chimici secreti dalle cellule tumorali.
Incubare la piastra per il tempo desiderato.
Durante l'incubazione, i modulatori chimici attirano i TAM. Ciò porta al movimento dei TAM nel compartimento inferiore attraverso la membrana dell'inserto poroso attraverso la chemiotassi indotta da sostanze chimiche.
Ora, rimuovi l'inserto dal pozzo. Trasferire il terreno condizionato contenente la popolazione migrante di TAM in una piastra adatta per la misurazione fluorescente.
Trattare le cellule con un tampone di lisi contenente colorante fluorescente.
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