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Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 6:41 min. • April 30th, 2023
La coltura in vitro degli astrociti aiuta a studiare il ruolo biologico degli astrociti, le cellule cerebrali più abbondanti.
Inizia con un cervello di topo neonatale posto sotto un microscopio da dissezione.
Rimuovere i bulbi olfattivi e il cervelletto.
Eseguire un'incisione della linea mediana tra i due emisferi per separare la corteccia.
Rimuovere le meningi per evitare la contaminazione nella coltura degli astrociti da fibroblasti e cellule meningee.
Trasferisci gli emisferi della corteccia in un mezzo ghiacciato e tritali in piccoli pezzi.
Raccogli i pezzi corticali in una provetta contenente tripsina. La tripsina, un enzima proteasi, digerisce le proteine di adesione cellulare, facilitando la separazione cellulare.
Centrifuga per pellettare il tessuto digerito.
Rimuovere il surnatante e aggiungere un mezzo astrocitario al pellet. Pipettare energicamente per rilasciare una popolazione cellulare mista di astrociti, microglia e cellule precursori degli oligodendrociti o OPC.
Seminare questa sospensione cellulare in un pallone di coltura tissutale rivestito di polilisina e incubare.
Le cellule caricate negativamente si attaccano alla polilisina caricata positivamente e crescono s
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