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0 visualizzazioni • 7:02 min. • April 30th, 2023
La barriera emato-encefalica, o BBB, è una barriera selettiva di cellule endoteliali e cellule cerebrali come gli astrociti che regola il trasporto di sostanze tra il sangue e il cervello.
Per sviluppare un modello BBB, capovolgere un inserto a membrana sul coperchio di una piastra di coltura.
Semina gli astrociti sulla membrana. Posizionare la piastra di coltura sopra l'inserto e incubare.
Questo intrappola gli astrociti tra la membrana e la superficie del pozzo.
Capovolgere la piastra per portare gli astrociti sul fondo e aggiungere un mezzo adatto al pozzetto.
All'inserto, aggiungere cellule endoteliali che esprimono proteine di giunzione stretta ottimali che migliorano i contatti cellula-cellula necessari per la formazione della barriera.
Incubare per consentire alle cellule endoteliali di aderire alla membrana.
Rimuovere il terreno esaurito e trasferire l'inserto in un altro terreno di coltura per astrociti ben contenuto e privo di fattore di crescita.
Successivamente, aggiungere all'inserto un terreno di coltura endoteliale privo di fattore di crescita e incubare.
L'assenza di fattori di crescita inibisce la divisione cellulare, preservando i contatti cellula-cellula e stabil
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