Saggio di permeabilità mimica della barriera emato-encefalica: un test in vitro per valutare la permeabilità della BBB che imita le molecole traccianti
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0 visualizzazioni • 2:53 min. • April 30th, 2023
La barriera emato-encefalica, o BBB, costituita da cellule endoteliali, periciti e astrociti, regola l'afflusso e l'efflusso di molecole biologiche e aiuta a mantenere l'omeostasi cerebrale.
Per valutare la permeabilità del modello di BBB in vitro, iniziare con un modello di BBB in vitro costituito da cellule endoteliali aderenti sul lato superiore o sanguigno dell'inserto della membrana porosa e astrociti aderenti sul lato basale o cerebrale della membrana.
Le cellule endoteliali con la loro matrice extracellulare entrano in contatto con gli astrociti, formando il mimico della BEE.
Trasferire il volume desiderato di terreno dal sangue e dal lato del cervello in una piastra nera a più pozzetti per una misurazione ottimale della fluorescenza.
Sostituire i terreni dal lato del sangue della coltura con terreni contenenti molecole traccianti fluorescenti a basso peso molecolare.
In coltura, i contatti tra cellule endoteliali e astrocitarie rafforzano la barriera cellulare e stabilizzano la barriera stretta, limitando la diffusione delle molecole traccianti al lato cerebrale della coltura.
Inoltre, raccogliere volumi adeguati di terreno dal sangue e dal lato del cervello nei punti tempo
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