Preparazione dell'impalcatura seminata MSC: una tecnica per preparare l'impalcatura seminata con cellule staminali mesenchimali per l'impianto chirurgico in un modello murino

Le cellule tumorali producono fattori di homing chemiotattici per attirare le cellule staminali mesenchimali o MSC dai vasi sanguigni verso la posizione del tumore.

Per studiare l'effetto di queste cellule sulla crescita tumorale in vitro, iniziare prendendo un substrato di scaffold sterilizzato. Trasferirlo in una piastra a pozzetti contenente il supporto desiderato per pre-bagnare l'impalcatura. Posizionarlo su una superficie asciutta per rimuovere il materiale in eccesso che si attacca all'impalcatura per una migliore adesione delle cellule. Trasferire l'impalcatura parzialmente asciutta in un pozzo fresco. Semina una goccia di sospensione di MSC sull'impalcatura.

Inoltre, aggiungere altro terreno negli angoli del pozzetto per creare una camera di idratazione che impedisca l'evaporazione del terreno dalla goccia durante la successiva incubazione. Incubare per consentire alle MSC di aderire alla superficie dell'impalcatura. Capovolgere l'impalcatura per esporre la superficie non seminata. Pipettare una goccia fresca di sospensione di MSC su questo lato e lasciare che le MSC aderiscano.

Dopo che le MSC hanno aderito a entrambi i lati dell'impalcatura, coprirla con altro terreno as